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案例展示
诱发性案例展示二
裸鼠成瘤
研究背景及目的:
肿瘤是指人体在各种致瘤因子的作用下局部组织细胞异常增生所形成的新生物。肿瘤发生的原因至今仍未完全清楚,与遗传、环境、饮食、基因突变等都有一定的关系。早期肿瘤的症状并不明显,随着病情进展可以出现局部肿块,可以出现疼痛、破溃、出血、感染、梗阻、转移等并发症,严重者可以危及生命,特别是恶性肿瘤,对于人们的身体健康更是影响极大。肿瘤的治疗以手术切除为主,恶性肿瘤还需要根据情况进行放射治疗、化疗、内分泌治疗、靶向治疗等综合治疗。现今社会肿瘤病发率越来越高,种类也是各种各样,且治疗难度较大,为了更深入的了解各种肿瘤的特异性和治疗途径,前期一般选用模型动物小鼠。
实验对象:选用C57小鼠或免疫缺陷的裸鼠
实验方式:一种是肿瘤细胞皮下成瘤模型 ,一种人源肿瘤组织来源原位移植瘤动物模型
皮下成瘤实验方法:
取对数生长的细胞,取处于对数生长期的细胞,细胞达80-90%左右密度为宜,胰酶消化细胞后用预冷的PBS洗两遍,目的为去除细胞中的血清。用PBS或者无血清培养基吹打细胞沉淀至合适的浓度,一般皮下瘤接种的细胞量为1-5×10^6个细胞/支,接种体积为0.1ml,因此细胞悬液的浓度为1-5×10^7个细胞/ml。
结果测定:
宏观检测;一般一周左右开始成瘤,可肉眼观察或手指触摸,用游标卡尺测量直径计算体积。
微观检测:可在细胞中加入荧光素酶,后期通过小动物活体成像,观察想要的指标
肿瘤取材;根据具体的实验目的取材肿瘤或生成肿瘤后小鼠的部分组织或者血液,做相关的病理学检测,和蛋白检测,如切片,血常规,免疫荧光,WB,QPCR等
活体成像