胆结石病是一种常见的消化系统疾病,根据结石部位的不同,可以分为:胆囊结石、肝内胆管结石和肝外胆管结石。研究表明胆结石的形成,与高胆固醇饮食、遗传因素、胆道感染、寄生虫感染和药物因素等有关。建立胆结石动物模型,可以更好的进行胆结石预防和治疗药物的开发研究。
文献中,多是通过高脂、高热量、高胆固醇饲料进行饮食诱导建立动物模型[1][2]。具体的实验步骤如下:
1、实验动物:BalB/C小鼠,12周龄,体质量(108.65 ± 12.09g ),雌雄各半。每组10只
2、实验分组
A组:正常对照组
B组:模型组
3、建模方法和周期
A组:正常饲料
B组:高脂、高热量、高胆固醇(脂肪15%、胆固醇1%、胆酸0.5%)饲料。
连续饲养8周。
4、处死小鼠,分离血清和组织样本,进行检测
(1)胆结石观察拍照
有结石形成的胆囊[2]
(2)血清肝功能指标测定:检测各组小鼠血清中三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、总胆红素(TBiL)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆汁酸(TBA)、直接胆红素(DBiL)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)的水平。
(3)肝脏病理组织观察:肝脏组织固定,切片,HE染色
(4)RT -qPCR:小鼠肝脏组织中 LXR 和 HMGCR mRNA 表达水平测定
(5)Western blot:检测LXR和HMGCR在小鼠肝脏组织中的蛋白表达水平
参考文献:
[1]汤杰,陈国裕,姚瑶,等.复方溶石剂对胆结石模型小鼠的作用及机制[J].中国药业,2023,32(05):57-60.
[2]冯时.大黄灵仙胶囊调控小鼠胆囊结石形成机制中SHP、LRH-1表达变化的研究[D].右江民族医学院,2022.DOI:10.27908/d.cnki.gymzy.2022.000038.