新生儿缺氧缺血性脑病（Hypoxic Ischemic Encephalopathy, HIE）是一种因围产期窒息导致的大脑缺氧缺血性损害，对新生儿的生命构成严重威胁，是全世界新生儿死亡和致残的重要原因之一。HIE 死亡率较高，幸存患儿临床表现为一系列脑病症状，如意识障碍、智力发育障碍和运动功能损伤等神经系统后遗症，病情危重者可有惊厥及呼吸衰竭。HIE（缺氧缺血性脑病）动物模型可以模拟和研究HIE的病理生理过程，从而深入理解该疾病的发病机制，并探索潜在的治疗方法。
文献通过手术结扎动物颈总动脉和营造缺氧环境，来模拟HIE缺氧缺血的特点，从而建立新生小鼠缺氧缺血性脑损伤模型[1]。
实验动物：7日龄，KM新生小鼠，体重2-4g。
2、实验分组
① 假手术组（sham）
② 模型组（HIE）
3、造模方法
① 小鼠进行2%~3%异氟烷吸入麻醉，分离并结扎小鼠右颈总动脉。
② 手术后回窝休息1h后，置于37℃、缺氧箱（8% O2 + 92% N2）中缺氧90 min。假手术组仅进行麻醉并剥离右颈总动脉处理。
4、模型评估检测
（1）Morris水迷宫实验，评价小鼠的学习记忆能力。
（2）脑梗死面积测量，脑水含量检测 。
（3）脑组织HE和Nissl染色。
（4）脑组织Ki67免疫荧光染色。
（5）qPCR和western blot，检测相关基因和蛋白的表达。
（6）脑组织切片ROS染色。
（7）组织透射电镜观察。
5、检测结果
图1 小鼠HIE后学习记忆能力
1A.小鼠游泳路线的代表图片；1B.60s内小鼠穿越平台次数以评估小鼠HIE后记忆能力,∗P<0.05
图2 小鼠HIE后脑缺血面积和脑水肿
2A.脑冠状切片；2B.TTC染色脑缺血面积统计结果；2C.脑水含量检测
图3 小鼠HIE后脑组织形态学损伤
图4 HIE小鼠海马内源性神经干细胞增殖的变化
4A.real-time PCR检测神经细胞标记基因（MAP2、NeuroD1、Sox2、Nestin）；4B.Western blot检测p-Akt，Akt
模型特点与sham对照组相比，HIE模型组的小鼠有学习和记忆等认知功能障碍。组织病理和标记基因的表达水平检测结果显示，HIE模型组小鼠产生脑梗死和脑水肿，神经元受到损伤，神经干细胞增殖受到抑制。
参考文献：[1]姚远,赵曼,杜静怡,等.6-姜酚改善新生小鼠缺氧、缺血性脑损伤后认知行为及其机制[J].解剖学报,2023,54(03):296-304.DOI:10.16098/j.issn.0529-1356.2023.03.007.
