免疫性肝损伤(AIH)模型小鼠构建

刀豆球蛋白 A(Concanavalin A ,Con A) 是一种植物凝集素,可以激活 T 细胞的丝裂原, 活化T淋巴细胞而致免疫性肝损伤。Con A 诱导的小鼠免疫性肝损伤模型,具有肝脏特异性、剂量依赖性和制作简便快捷的特点,而且损伤机制为 CD4+ T 细胞介导,与人类的病毒性肝炎发病机理十分相近,被认为是较为理想的研究人类病毒性肝炎病理机制的动物模型。
文献报道中,Con A尾静脉注射BalB/C 小鼠,8-12h内可引起明显的肝损伤[1]。具体的造模步骤如下:
1、实验动物:KM小鼠,5周龄,雄性,体质量18-22g,SPF级。
2、实验分组:空白组,模型组。
3、造模:实验小鼠适应性饲养1周后,模型组小鼠尾静脉注射20mg/kg ConA(生理盐水稀释2mg/mL),空白组小鼠注射等量的生理盐水。
4、取材检测
称量小鼠体重后,进行下列实验:
(1)ConA注射8h后,摘眼球取血,血清检测丙氨酸氨基转移酶 (ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶 ( AST)水平。

(2)安乐死小鼠,取小鼠肝和脾。
① 称量肝组织、脾组织,计算肝脾指数。

② 肝组织匀浆,离心后取上清液,ELISA检测超氧化物歧化酶 ( SOD)和丙二醛 ( MDA)含量。

③ 肝组织固定后,切片,HE染色病理检查。

5、模型特点
与正常组相比,模型组有以下特点:
(1)肝脾指数,明显上升(表1)。
(2)血液中ALT和AST水平,明显上升(表2)。
(3)肝组织中,SOD水平明显降低,MDA水平明显增加(表3)。
(4)HE染色的肝细胞浆颜色变浅,细胞分散,肝窦不清晰,且不见肝索, 甚至有可见点状坏死、炎细胞浸润等表现(图2)。
参考文献:
[1] 张云城,盛国光,胡世平.海珠益肝加味方对刀豆蛋白A诱导免疫性肝损伤小鼠的保护作用[J].世界中医药, 2020, 15(9):4.DOI:10.3969/j.issn.1673-7202.2020.09.013.

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