AOM（偶氮甲烷）联合DSS（葡聚糖硫酸钠盐）诱导结肠癌模型是一种常用的实验方法，用于模拟人类结肠癌的发生发展过程。以下是该模型构建方法的详细步骤：
一、实验材料
- 实验动物：选用C57BL/6或BALB/c雄性小鼠，年龄为4~8周龄。
- 实验试剂：AOM、DSS、无菌水、生理盐水等。
二、试剂配制
- DSS溶液：使用无菌水配制1%~3%浓度的DSS溶液，储存在4℃备用。
- AOM溶液：用无菌水溶解AOM配制10mg/mL的储存液，分装后放到-20℃保存，避免反复冻融。使用之前，融化分装母液并用无菌生理盐水1:10倍稀释。
三、实验步骤
- 小鼠准备：称重并标记小鼠，确保实验小鼠处于良好的健康状态。
- AOM注射：实验组小鼠腹腔注射AOM，剂量通常为10mg/kg，也可根据实验需求调整至10~20mg/kg。
- 适应期：注射AOM后，让小鼠正常饮水一周，以消除应激反应并适应新环境。
- DSS处理：用2% DSS饮用水替换常规饮用水，喂食小鼠一周，以诱发结肠炎。DSS的致炎机制可能与影响DNA合成、抑制上皮细胞增生、破坏肠黏膜屏障、导致巨噬细胞功能障碍及肠道菌群失调有关。
- 恢复期：将DSS饮用水更换为常规饮用水，喂食小鼠两周，以观察结肠炎的恢复情况。
- 循环处理：将步骤4和步骤5重复2~3次，以模拟结肠癌的癌变过程。整个实验过程通常称为“三步法”或“四步法”，具体取决于循环的次数和实验设计。
四、监测与评估
- 体重变化：定期监测小鼠的体重变化，作为评估健康状况和肿瘤形成的指标之一。
- 便血情况：使用便隐血试纸检测小鼠的便血情况，以评估结肠炎的严重程度和肿瘤的形成。
- 组织病理学检查：在实验结束后，对小鼠的结肠组织进行病理学检查，包括大体观察、HE染色等，以确认肿瘤的形成和类型。
五、注意事项
- 实验过程中需严格遵循实验室安全规定和动物伦理原则。
- 小鼠的品种、年龄、性别等因素可能影响模型的稳定性，因此实验设计需充分考虑这些因素。
- AOM和DSS的剂量、浓度和处理时间等参数可根据实验需求进行调整，但需在保证实验效果的同时确保小鼠的存活率。
通过AOM联合DSS诱导结肠癌模型，可以模拟人类结肠癌的发生发展过程，为结肠癌的研究提供有力的工具。
