LPS（脂多糖）诱导急性肾损伤（AKI）模型的构建方法通常涉及给实验动物（如小鼠或大鼠）注射LPS，以模拟人类因感染或内毒素血症引起的急性肾损伤。以下是详细的构建方法：

一、实验动物与分组

1. 实验动物选择：

   • 常用的实验动物包括SPF级（无特定病原体）的C57BL/6小鼠或SD大鼠。
   • 选择雄性动物，年龄和体重需控制在一定范围内，以确保实验的一致性和可重复性。例如，对于小鼠，常选用12周龄、体重20~25克的雄性小鼠。

2. 实验分组：

   • 将实验动物随机分为对照组和LPS模型组。
   • 每组动物数量根据实验需求确定，通常每组至少包含6~10只动物，以减少实验误差。

二、造模方法

1. 适应性饲养：

   • 在正式实验前，将实验动物置于适宜的环境中适应性饲养一周，以确保其生理状态稳定。

2. LPS注射：

   • 注射剂量：对于小鼠，常用的LPS注射剂量为10 mg/kg体重。对于大鼠，剂量可能有所不同，具体需根据实验条件和文献报道确定。
   • 注射方式：通过腹腔注射给予LPS。注射前需对实验动物进行适当固定，确保注射过程顺利。
   • 注射时间：单次注射LPS即可诱导急性肾损伤模型。注射时间通常选择在上午，以便后续观察和取样。

3. 后续观察：

   • 注射LPS后，密切观察实验动物的精神状态、活动度、进食饮水情况等。
   • 根据实验需求，在注射后的不同时间点（如6小时、12小时、24小时等）进行后续取样和检测。

三、模型验证与检测

1. 血、尿指标检测：

   • 在注射LPS后的不同时间点，收集实验动物的尿液和血液样本。
   • 使用生化分析仪或试剂盒检测血清肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）、血钾（K⁺）等指标，以评估肾功能损伤程度。
   • 同时，可检测尿液中的尿蛋白、红细胞等指标，以反映肾脏的滤过功能。

2. 肾组织病理检查：

   • 在注射LPS后的适当时间点（如24小时），处死实验动物并取肾脏组织进行病理检查。
   • 将肾脏组织制备成石蜡切片或冰冻切片，进行HE染色、PAS染色等，观察肾小球的病理变化，如肾小球肿胀、细胞增生、毛细血管袢塌陷等。
   • 评估肾小管的损伤程度，如肾小管上皮细胞肿胀、变性、坏死及管型形成等。

3. 其他检测：

   • 根据实验需求，还可以进行其他检测，如检测血清和肾脏组织中的炎症因子（如TNF-α、IL-1β、IL-6等）表达水平，以反映肾脏的炎症反应程度。
   • 使用流式细胞术或免疫荧光技术检测肾脏组织中的免疫细胞浸润情况。

四、注意事项

1. LPS的保存与配制：

   • LPS应保存在-20℃的冰箱中，避免反复冻融。
   • 使用前，将LPS溶于无菌生理盐水或PBS中，确保溶液无菌且浓度准确。

2. 实验动物的护理：

   • 在造模期间和造模后，需密切关注实验动物的健康状况，及时处理可能出现的并发症。
   • 提供适宜的生活环境、饮食和饮水，确保实验动物的生理状态稳定。

3. 伦理审查：

   • 在进行动物实验前，需提交实验方案进行伦理审查，确保实验过程符合动物伦理规范。

五、模型应用

LPS诱导的急性肾损伤模型可用于研究急性肾损伤的发病机制、病理变化及药物治疗。通过该模型，可以筛选和评价具有肾保护作用的药物，为临床治疗急性肾损伤提供实验依据。

此外，该模型还可用于研究肾脏的免疫调节机制、细胞凋亡与坏死机制等，为深入探讨肾脏疾病的本质提供重要的实验工具。