STZ（链脲佐菌素）联合高脂饲料、下肢烫伤构建I型糖尿病足模型的方法，是一种综合了化学诱导、饮食干预和物理损伤的动物实验方法，旨在模拟人类I型糖尿病足（Diabetic Foot, DF）的发病过程，研究其病理生理机制及评估治疗策略。以下是该模型构建方法的详细步骤：
一、实验准备
实验动物选择
- 选用健康的雄性SD大鼠，体重一般在180~220克。雄性大鼠在糖尿病模型制备中的成功率显著高于雌性大鼠。
试剂与材料准备
- STZ溶液：使用无菌柠檬酸钠缓冲液（pH 4.5）将STZ配制成1%~2%的溶液。STZ溶液需现用现配，避光保存。
- 高脂饲料：在基础饲料的基础上，添加猪油、蔗糖和胆固醇等成分，以模拟人类高脂饮食。常用配方为猪油18%、蔗糖20%、蛋黄3%、基础饲料59%。
- 烫伤工具：如恒温水浴锅、温度计等，用于控制烫伤的温度和时间。
二、模型构建步骤
高脂饲料喂养
- 将实验大鼠分为模型组和对照组。模型组大鼠开始饲喂高脂饲料，对照组大鼠则继续饲喂基础饲料。高脂饲料喂养的时间一般为4~6周，以诱导胰岛素抵抗。
STZ注射
- 在高脂饲料喂养4周后，对模型组大鼠进行腹腔注射STZ溶液。注射前大鼠需禁食12~16小时，不禁水。
- 按照预定剂量（如65mg/kg体重）注射STZ溶液，注射后给予充足的清洁饮水和食物。
血糖监测与糖尿病模型验证
- 注射STZ后，定期监测大鼠的血糖水平。一般从注射后3天开始，每周检测一次空腹血糖。
- 当模型组大鼠的血糖持续高于16.7mmol/L时，可判定糖尿病模型成功。
下肢烫伤处理
- 在糖尿病模型成功建立后，对模型组大鼠的下肢进行烫伤处理。烫伤前需对大鼠进行麻醉，以减少疼痛和应激反应。
- 使用恒温水浴锅将大鼠下肢浸入设定温度的热水中，烫伤时间根据实验需求确定。烫伤后，立即用冷水冲洗烫伤部位，以降低组织损伤程度。
- 烫伤后，对大鼠进行伤口护理，如涂抹抗生素软膏、包扎伤口等，以防止感染。
糖尿病足模型验证
- 在烫伤后的不同时间点（如1周、2周、4周等），观察大鼠下肢伤口的愈合情况、感染程度以及组织坏死情况等。
- 通过组织学检查、微生物培养等方法评估糖尿病足模型的成功与否。成功的模型应表现出伤口愈合延迟、感染加重、组织坏死等病理改变。
三、实验注意事项
STZ的稳定性
- STZ对水和光不稳定，应在低温、干燥、避光条件下保存。配制好的STZ溶液应在30分钟内完成注射，以确保其活性。
动物的体重和性别
- 动物的体重和性别对模型的成功率有影响。雄性大鼠的成模率通常高于雌性大鼠，体重适中的大鼠更容易成功建模。
高脂饲料的配制
- 高脂饲料的成分和比例应根据实验需求进行适当调整，以确保能够有效诱导胰岛素抵抗。
烫伤条件的控制
- 烫伤的温度和时间应严格控制，以避免对大鼠造成过度损伤或死亡。烫伤前应对大鼠进行充分的麻醉和保温措施。
伤口护理与感染预防
- 烫伤后应对大鼠进行细致的伤口护理和感染预防工作，以确保模型的稳定性和可靠性。
四、模型特点与应用
模型特点
- 该模型通过高脂饲料喂养、STZ注射和下肢烫伤相结合的方式，成功模拟了人类I型糖尿病足的发病过程。模型大鼠表现出持续高血糖、胰岛素抵抗、伤口愈合延迟、感染加重等病理改变，与人类的DF症状相似。
模型应用
- 该模型可用于研究DF的发病机制、病理生理变化及评估治疗策略。通过该模型，可以筛选具有潜力的治疗药物和方法，为临床治疗提供科学依据。
综上所述，STZ联合高脂饲料、下肢烫伤构建I型糖尿病足模型是一种有效的动物实验方法，具有广泛的应用前景。在实际应用中，应根据实验需求和条件进行适当调整和优化，以确保实验结果的准确性和可靠性。
