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PD诱导大鼠腹膜纤维化模型

腹膜透析(peritoneal dialysis,PD)常用于终末期肾病的治疗,但是随着PD治疗时间的延长,非生理性透析液长期使用,导致腹膜纤维化,使得患者腹膜通透性随之增加,腹膜超滤功能随之衰竭,最终导致PD治疗失败。腹膜纤维化病理生理特征表现为:炎症因子TNF-α、IL-6升高促进纤维化;而成纤维细胞活化,导致胶原蛋白过度沉积,进而导致细胞外基质沉积;同时新生血管增加,进一步加剧纤维化。有研究通过模拟腹膜纤维化的病因,构建大鼠腹膜纤维化动物模型,评估药物的治疗效果[1]。

1、实验动物:SD大鼠,雄性,体质量约200-250g,SPF级。

2、实验分组

① 正常对照组(Control组)

② 模型组(PD组)

3、造模方法

(1)适应性喂养大鼠1周后,分为正常对照组(Control组)和模型组(PD 组)。

(2)模型组大鼠行5/6肾切除术,术后1周检测Scr和BUN水平显著高于正常大鼠后,在大鼠右下腹靠近腹股沟中点处腹腔注射1.5% PD液 100mL/(kg·d),每天1次,连续4周。正常大鼠腹腔注射等体积生理盐水。

4、模型检测

① 血清中Scr和BUN水平检测

② 腹膜组织病理学观察:HE染色和Masson染色

③ IHC 检测腹膜组织微血管密度(CD31)及α-SMA、LN蛋白

5、模型特点

与Control组相比,PD 模型组有以下特点:

(1)PD组大鼠血清中Scr和BUN水平均显著升高(表 2)。

(2)Control组大鼠腹膜组织间皮细胞排列整齐、紧密;而PD 组大鼠腹膜组织结构松散,腹膜间皮细胞脱落,腹膜层及间皮下基质增厚,大量成纤维样细胞及单核、巨噬细胞浸润,纤维素样物质沉积(图 1)。PD组大鼠腹膜厚度和胶原纤维沉积占比均显著增加(图2和表 3)

(4)PD组大鼠腹膜组织微血管密度显著升高(图 3和表 4)。

(5)PD 组大鼠腹膜组织中 α-SMA、LN蛋白表达水平均显著升高(图 4和表4)。