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高氧诱导大鼠支气管肺发育不良模型

高氧诱导大鼠支气管肺发育不良(bronchopulmonary dysplasia,BPD)模型的构建方法主要包括以下步骤:

一、实验动物与分组

  • 动物选择:选用新生SD大鼠作为实验动物,因为SD大鼠具有繁殖力强、生长迅速、对实验条件适应性好等优点。
  • 分组:将新生SD大鼠随机分为高氧组和空气组(对照组)。高氧组置于高氧环境中,而空气组则置于正常空气中。

二、高氧环境设置

  • 氧箱制备:准备一个自制的氧箱,用于放置高氧组的大鼠及其代母鼠。氧箱应保持良好的密封性,以确保氧浓度的稳定。
  • 氧浓度控制:使用测氧仪控制氧箱内的氧浓度维持在60%左右。同时,放置钙石灰以吸收二氧化碳,防止箱内二氧化碳浓度过高。
  • 环境条件:氧箱内的温度应保持在2526℃,湿度保持在60%65%,以模拟适宜大鼠生长的环境条件。

三、饲养与管理

  • 饲养条件:空气组和高氧组的大鼠饲养条件应保持一致,除了氧浓度不同外,其他饲养条件如饲料、水、垫料等应相同。
  • 日常观察:每天定时开箱观察大鼠的存活情况、活动度、呼吸频率、唇色等体征。同时,每天称重并记录大鼠的体重变化。
  • 母鼠互换:为了防止母鼠氧中毒,需要定期将氧箱中的母鼠与空气对照组的母鼠互换。

四、模型验证

  • 时间点选择:在高氧暴露后的特定时间点(如4天、14天等)进行检查和验证。
  • 肺组织病理学检查:通过剖胸、气管插管、肺组织灌注、固定、切片、染色等步骤,制作肺组织石蜡切片,并在光镜下观察肺组织的病理学改变。主要观察肺泡结构是否紊乱、肺泡是否增大、间隔是否增厚等。
  • 其他指标检测:根据需要,还可以检测其他相关指标,如辐射状肺泡计数(RAC)、平均肺泡直径(MAD)、肺泡间隔厚度(AST)等,以综合评价肺泡的发育情况。

五、注意事项

  • 实验动物数量:每组实验动物的数量应足够多,以确保实验结果的可靠性和统计学意义。
  • 实验条件控制:在实验过程中,应严格控制实验条件,避免其他因素对实验结果产生干扰。
  • 伦理审查:在实验开始前,应提交实验方案进行伦理审查,确保实验过程符合动物伦理和福利要求。

通过以上步骤,可以成功构建高氧诱导的大鼠支气管肺发育不良模型,为后续的研究提供可靠的实验动物模型。