一、实验动物选择
‌动物种系‌：新生SD大鼠（7日龄），雌雄不限，体重10-15g，优先选用SPF级幼鼠‌。

‌分组设计‌：实验组（LPS组）与对照组（等渗NaCl组），每组建议40只动物以覆盖多个时间点检测需求‌。

二、模型构建步骤

1. ‌LPS溶液配制与注射‌
‌剂量与溶剂‌：LPS溶于无菌生理盐水，按4 mg/kg体重腹腔注射（实验组），对照组注射等渗NaCl溶液（4 mL/kg）‌。

‌操作要点‌：使用1ml注射器（27G针头）进行腹腔注射，避免损伤内脏‌。
注射后观察幼鼠呼吸频率、皮肤颜色及活动状态，异常个体需及时剔除‌。

2. ‌术后观察与取材时间点‌
‌急性期检测‌：注射后3小时、6小时、12小时、24小时分批处死动物，每个时间点至少3只幼鼠‌。

‌取材规范‌：颈椎脱臼处死后，迅速开胸取肺组织：‌右肺‌：测定湿/干重比值（W/D），评估肺水肿程度‌。
‌左肺‌：4%多聚甲醛固定，用于HE染色观察肺泡结构破坏及炎性细胞浸润‌。

三、模型评价标准
‌病理学特征‌：‌HE染色‌：肺泡间隔增厚、肺泡腔塌陷、透明膜形成及中性粒细胞浸润‌。
‌肺湿/干重比（W/D）‌：模型组显著高于对照组（如24小时W/D从对照组0.81±0.03升至1.25±0.08）‌。

‌炎症指标‌：‌ELISA检测‌：肺组织匀浆液中IL-6、TNF-α浓度显著升高（如TNF-α在6小时达峰值）‌。
‌qRT-PCR‌：肺组织中miR-34a等炎症相关基因表达上调‌。

四、注意事项
‌存活率控制‌：幼鼠对LPS敏感性高，剂量超过5 mg/kg可能导致死亡率＞30%，建议采用4 mg/kg‌。

‌操作规范‌：腹腔注射需避开肝脏和膀胱，注射后轻揉腹部促进药物扩散‌。
幼鼠体温调节能力差，术后需置于35-37℃保温箱中恢复‌。

‌模型验证‌：设立生理盐水对照组及阳性药物干预组（如地塞米松），验证炎症反应的时效性‌。

‌说明‌：该模型通过LPS激活TLR4/NF-κB通路诱导肺泡上皮损伤和肺表面活性物质减少，模拟早产儿NRDS的病理特征，适用于肺保护药物筛选及发病机制研究‌。