邻苯二甲酸二丁酯（DBP）诱导尿道下裂模型的构建方法，通常用于研究环境内分泌干扰物对尿道下裂发生的影响及其机制。以下是一种常用的DBP诱导尿道下裂模型的构建方法：
实验材料
实验动物：
- 清洁级Sprague-Dawley（SD）大鼠，雌性大鼠体重约为230±20克，雄性大鼠体重约为300±20克。
实验试剂：
- 邻苯二甲酸二丁酯（DBP）
- 精制大豆油（作为溶剂）
实验步骤
实验动物的准备：
- 将雄性大鼠和雌性大鼠按1:2的比例合笼饲养，每天清晨固定时间做阴道涂片，显微镜下检查涂片上有无精子以确定是否受孕。
- 确定受孕后，将孕鼠单笼饲养，记录受孕日期作为妊娠第0天。
实验分组与干预：
- 将孕鼠随机分为实验组和对照组，每组15只。
- 实验组：自孕鼠妊娠第12天至第20天，每天经口灌胃给予DBP，剂量为500毫克/千克体重（溶于精制大豆油中），灌胃容积为每只1毫升/天。
- 对照组：同期给予等量的大豆油作为溶剂对照。
观察与记录：
- 在孕鼠分娩后，对新生大鼠进行计数，并在解剖显微镜下测量雄性新生鼠的肛门生殖器距离（AGD）和称体重。
- 在雄性仔鼠出生后70天（大鼠性成熟期），逐个检查尿道下裂的发生情况，记录尿道下裂的发生率。
样本采集与分析（可选）：
- 在孕鼠妊娠第20天，对部分孕鼠进行剖宫产，取出子鼠测量AGD并判断雌雄。
- 取雄性子鼠的睾丸组织，使用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）等方法检测睾酮合成过程中限速酶（如细胞色素P450胆固醇侧链裂解酶、3β羟基类固醇脱氢酶、细胞色素P450 170α-羟化酶）的mRNA含量水平，以探讨DBP对睾酮合成的影响。
实验结果预期
- 实验组雄性仔鼠尿道下裂的发生率显著高于对照组。
- 通过检测睾酮合成过程中限速酶的mRNA含量水平，可能发现DBP对睾酮合成具有抑制作用。
实验注意事项
实验动物的饲养与护理：确保实验动物在适宜的环境条件下饲养，提供充足的饲料和饮水，定期观察动物的健康状况。
实验试剂的配制与保存：DBP应溶于精制大豆油中，现用现配，避免长期保存导致试剂失效。
灌胃操作的规范：灌胃时应使用合适的灌胃针和灌胃管，确保灌胃容积和速度适中，避免对孕鼠造成不必要的刺激。
样本采集与分析的严谨性：在采集样本时应避免污染，确保样本的完整性和代表性；在分析样本时应采用合适的方法和标准，确保结果的准确性和可靠性。
通过上述方法，可以成功构建DBP诱导的尿道下裂模型，为进一步研究DBP对尿道下裂发生的影响及其机制提供实验依据。
