一、实验动物选择
‌动物种系‌：‌兔‌：优先选用新西兰大白兔或日本大耳兔，13-15周龄，性别不限‌。
‌大鼠‌：SD大鼠，6-8周龄，雄性，体重180-220g‌。

二、模型构建步骤

1. ‌术前准备‌
‌禁食‌：实验前禁食12小时，自由饮水‌。
‌麻醉‌：兔采用3%戊巴比妥钠（1ml/kg）静脉麻醉；大鼠采用腹腔注射戊巴比妥钠（40mg/kg）‌。
‌备皮消毒‌：颈部剃毛，碘伏消毒手术区域‌。

2. ‌手术操作‌
‌气管暴露‌：沿颈腹中线切开皮肤及皮下组织，钝性分离肌肉，暴露气管软骨环‌。
‌气管切开‌：于第3-4气管环间纵向切开约1/3气管周径，长度约5mm‌。
‌尼龙刷刷擦‌：‌兔模型‌：用直径5mm硬质尼龙刷（无菌）沿气管内壁反复刷擦30次，模拟黏膜损伤‌。
‌大鼠模型‌：尼龙刷刮擦10-15次，深度至黏膜下层，避免穿透气管壁‌。

‌缝合闭合‌：4-0可吸收线间断缝合气管切口，逐层缝合颈部肌肉及皮肤‌。

3. ‌术后管理‌
‌观察苏醒‌：术后置于保温垫恢复自主呼吸，监测呼吸频率及活动状态‌。
‌抗生素预防感染‌：术后连续3天肌注青霉素（兔：5万U/kg；大鼠：2万U/kg）‌。

三、模型验证与评价

‌存活率与症状观察‌：
‌兔模型‌：术后7-14天存活率≥80%，表现为呼吸急促、喘鸣‌。
‌大鼠模型‌：术后8天存活率显著下降（模型组0% vs. 伪手术组100%）‌。

‌病理学检测‌：
‌狭窄度测量‌：术后10-14天取材，计算气管狭窄度（模型组兔：41.5%-60.28%；大鼠：60.28%）‌。
‌HE染色‌：术后7天：黏膜下层新生毛细血管及炎症细胞浸润‌。
术后10天：肉芽组织增生达高峰，伴纤维母细胞及中性粒细胞浸润‌。
术后14天：胶原纤维沉积，瘢痕组织形成，管腔狭窄稳定‌。

‌Masson染色‌：胶原纤维比例显著升高，提示纤维化进展‌。

‌炎症因子检测‌：
‌ELISA‌：血清及肺泡灌洗液中IL-6、IL-8、TGF-β1、VEGF水平显著升高‌。

四、注意事项
‌存活率控制‌：大鼠模型因气道狭窄严重易窒息死亡，需缩短观察周期或优化刷擦力度‌。
‌刷擦标准化‌：尼龙刷直径、刷擦次数需严格统一，避免过度损伤导致急性气道闭塞‌。
‌术后护理‌：监测呼吸状态，及时清理气道分泌物，避免窒息‌。
‌模型稳定性‌：兔模型在术后10天狭窄程度达峰值，为大样本研究的理想时间窗‌。

‌说明‌：该模型通过机械损伤模拟临床气管狭窄的瘢痕增生机制，适用于探究抗纤维化药物（如红霉素‌6）或新型支架疗效‌4。不同种系需结合研究周期和病理观察需求选择‌。